C 52
GBZ
中華人民共和國國家職業(yè)衛(wèi)生標準
GBZ/T 160.81
-2004
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工作場所空氣中
生物類化合物的測定方法
Methods for d etermination of biological compounds
in the air of workplace
2004 年 5月 21 日發(fā)布 2004 年 12 月 1日實施
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中華人民共和國衛(wèi)生部 發(fā)布
GBZ/T 160.81
-2004
前
言
為貫徹執(zhí)行《工業(yè)企業(yè)設計衛(wèi)生標準》 (GBZ 1
)和《工作場所有害因素職業(yè)接觸限值》( GBZ 2
),
特制定本標準。本標準是為工作場所有害因素職業(yè)接觸限值配套的監(jiān)測方法 ,用于監(jiān)測工作場所空
氣中生物類化合物
[
包括 洗衣粉酶等 ]
的濃度。
本標準從 2004
年12
月1
日起實施。
本標準由全國職業(yè)衛(wèi)生標準委員會提出。
本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部批準。
本標準起草單位:上海醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院。
本標準主要起草人:梁友信等。
GBZ/T 160.81 - 2004
工作場所空氣中
生物類化合物的測定方法
1
范圍
本標準規(guī)定了監(jiān)測工作場所空氣中生物類化合物濃度的方法 。
本標準適用于工作場所空氣中生物類化合物 濃度的測定。
2
規(guī)范性引用文件
下列文件中 的條款,通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后
所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議
的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標準。
GBZ 159 工作場所空氣中有害物質(zhì)監(jiān)測的采樣規(guī)范
3
含酶洗衣粉中酶的抗體結(jié)合 — 比色法
3.1
原理
空氣中 含酶洗衣粉粉塵中的酶用玻璃纖維濾紙采集,洗脫后,與包被在酶標板上的特異性抗體
( Ab1
)結(jié)合,然后加入特異性抗體( Ab2
),最后與一連有標記物的 抗體(Ab3
)結(jié)合,再與顯色
劑反應生成有色化合物,比色定量。
3.2
儀器
3.2.1 玻璃纖維濾紙。
3.2.2 采樣夾,濾料直徑 40mm
。
3.2.3 小型塑料采樣夾,濾料直徑 25mm
。
3.2.4 空氣采樣器,流量 0
~ 10L/min
。
3.2.5 燒杯, 50ml
。
3.2.6 酶標板和酶標板蓋。
3.2.7 多孔道微量加樣器。
3.2.8 可調(diào)微量加樣器。
3.2.9 恒溫箱。
3.2.10 離心管, 25ml
。
3.2.11 具塞試管, 10ml
。
3.2.12 酶標儀。
3.3
試劑
實驗用水為去離子水。所有試劑于冰箱保存。
3.3.1 抗體包被緩沖液, pH
=9.6
±0.2
:稱取 1.51g
碳酸鈉和 2.93g
碳酸氫鈉,溶于 1000ml
水中。可
保存 2
個月。
3.3.2 洗板液:稱取 29
.22g
氯化鈉、 1.86g Tris
和1.0g
牛血清白蛋白 (BSA)
,溶于 1000ml
水中,用鹽
酸溶液 (
6mol/L )
調(diào) pH
至8.0
,加入 0.5ml
吐溫20
,混勻,可保存 1
周。
3.3.3 檸檬酸 -
磷酸緩沖液, pH
=5.0
±0.2
:稱取 7.30g
檸檬酸和 23.87g
磷酸氫二鈉 (Na
2HPO 4·12H 2O)
溶于 1000ml
水中,可保存 1
個月。
5.4 BSA 封閉液: 2.0g BSA
溶于100ml
洗板液中。
3.3.5 樣品萃取液:稱取 29.
22g
氯化鈉、 0.93g Tris
、4.96g
硫代硫酸鈉 (Na
2S2SO 3·5H 2O)
和0.147g
氯
化鈣 (CaCl
2·2H 2O)
,溶于約 800ml
水中,加入 1.0g BSA
,溶解后,用鹽酸溶液 (
6mol/L )
調(diào) pH
至8.0
,
轉(zhuǎn)移到 1000ml
容量瓶中,定容后加入 1.0ml
吐溫20
,混勻,可保存 1
周。
3.3.6 鄰苯二胺( OPD
)溶液, pH
=5.0
:稱取 8.0mg OPD
,置于50ml
棕色瓶中,加入 15ml
檸檬酸 -
磷酸緩沖液 ,溶解后,加入 5
µ l
過氧化氫 (30
%)
,混勻。臨用前配制。若溶液變黃,應重新配制。
3.3.7 兔抗體包被溶液:用 10ml
抗體包被緩沖液稀釋 10
µl
兔抗血清,混勻。
3.3.8 豚鼠抗體:用 10ml
洗板液稀釋 10
µl
豚鼠抗體,混勻。
3.3.9 標有過氧化物酶的兔抗豚鼠抗體:用 10ml
洗板液稀釋 10
µl
標有過氧化物酶的兔抗豚鼠抗體,
混勻。
3.3.10 硫酸溶液, 1mol/L
:將55.5ml
硫酸(
ρ
20= 1.84g/ml
)
慢慢加入 900ml
水中,混勻。
3.4
樣品的采集、運輸和保存
現(xiàn)場采樣按照 GBZ 159
執(zhí)行。
3.4.1 短時間采樣:在采樣點,用裝好玻璃纖維濾紙的采樣夾,以 5L/min
流量采集 15min
空氣樣品。
3.4.2 長時間采樣:在采樣點,將裝好玻璃纖維濾紙的小型塑料采樣夾,以 1L/min
流量采集 2
~ 8h
空氣樣品。
3.4.3 個體采樣:在采樣點,將裝好玻璃纖維濾紙的小型塑料采樣夾佩戴在采樣對象的前胸上部,以
1L/min
流量采集 2
~ 8h
空氣樣品。
采樣后,將玻璃纖維濾紙的接塵面朝里對折 2
次,放入清潔的塑料袋或紙袋中運輸和保存。
3.5
分析步驟
3.5.1
GBZ_T 160.81-2004 工作場所空氣有毒物質(zhì)測定 生物類化合物